諾氟沙星含量測定

點擊次數：5258 發布時間：2012-03-30

一、實驗方法

Cometro液相色譜系統；

紫外檢測器波長：278nm；

Kromasil C₁₈ 250*4.6mm 5u 色譜柱；

柱溫：25℃；

流動相：0.025mol/L磷酸溶液（用三乙胺調pH=3.0）：乙腈=87:13；

流速：1.00ml/min；

諾氟沙星對照品-0.15mg/ml，樣品；

進樣量：對照品分別進樣5ul，7.5ul，10ul，12.5ul，15ul各3次，樣品進樣10ul，使樣品與標準品1:1混合再進樣10ul，考察線性相關性，保留時間重現性，回收率。

二、譜圖結果

附進樣量，保留時間，峰面積關系表：

三、結果運算

1、保留時間重現性考察：

2、線性相關性考察及樣品含量計算：

以標準品進樣量為橫坐標，峰面積為縱坐標，得線性方程：

由此可算出樣品中諾氟沙星含量0.1205mg/ml。

3、回收率考察：

根據上面線性方程可算出混合后樣品含諾氟沙星0.1342mg/ml，而實際真值是0.1352mg/ml，因此得回收率為99.20%。

四、綜述

1、此三項考察綜合考察了Cometro 6000 PVW UV/VIS檢測器的吸收穩定性，Cometro 6000 LDI泵的流量性，進樣伐、進樣針的性，Kromasil色譜柱的性。

2、本實驗流動相中三乙胺看似作用是調節pH，其實際zui大作用是調整峰型，因為諾氟沙星有含氮性基團，在酸性環境中容易與色譜柱中的硅羥基產生靜電作用而拖尾，如下圖：

而三乙胺可以代替物質與硅羥基作用，了物質的峰型。因此調節pH時候得注意三乙胺的加入量，不能過少，可以直接加入適量三乙胺，再用磷酸調節pH。

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